細胞密度對于siRNA轉染實驗的影響是很大的。通常情況下，轉染試劑成功轉染siRNA的細胞會使得目標基因表達下調(diào)，但未成功轉染的細胞卻不受影響，這時轉染效率和總的細胞數(shù)量就顯得十分重要，密度過高或過低都會影響轉染效果：

 一般細胞數(shù)量較少時，轉染效率高，但是一些轉染試劑由于本身毒性的影響，細胞數(shù)量太低時毒性就變得明顯，導致細胞死亡率也高，所以得到的轉染效果并不可靠；

 較多的細胞數(shù)量則會導致細胞過度接觸和聚集在一起，這會減少轉染試劑和siRNA到達單個細胞的機會，從而降低轉染效率；并且，較高的細胞密度也可能導致細胞代謝活性下降，從而影響siRNA的敲除效率。

因此，在進行細胞轉染實驗時，需要根據(jù)轉染試劑和細胞類型等因素來優(yōu)化細胞密度，以提高轉染效率和減少干擾。我們建議在使用Starvio siRNA轉染試劑進行轉染時，細胞密度控制在30-50%之間，考慮到細胞增殖的問題，在轉染前一天鋪板時的細胞密度一般為25%左右。如果使用24孔板進行培養(yǎng)，細胞數(shù)一般為每孔4*104個，具體數(shù)量可根據(jù)細胞增殖快慢進行調(diào)整。如果要使用較大的培養(yǎng)板，可在此基礎上調(diào)整細胞鋪板數(shù)，如12孔培養(yǎng)板，每孔可接種細胞數(shù)8*104個，建議實驗者在此基礎上進行適當?shù)膬?yōu)化實驗以選擇最佳細胞接種數(shù)量。

此外，siRNA的轉染和DNA的轉染不一樣，DNA的轉染是過量表達，死亡一些細胞對過量表達的蛋白本身來說影響不大，但siRNA的轉染，死亡的細胞所有的基因表達（包括特定目標基因）都下降，將與siRNA造成的特定目標基因的表達下降現(xiàn)象是一致的，將大大影響實驗結果，因此選用低細胞毒性的轉染試劑也非常重要。目前，普通轉染試劑的主要成分為脂質(zhì)體或聚乙烯亞胺（PEI），這兩種成分都具有很大的細胞毒性，所以要求的細胞密度也較高，而Starvio siRNA采用的是新型可降解納米材料，毒性很低，只需要30-50%的細胞密度就可進行轉染，實驗者可放心按照說明書進行，切勿帶入常規(guī)轉染試劑的細胞密度要求進行實驗。