在探討肝臟特異性miR-192-5p對(duì)肝細(xì)胞癌腫瘤細(xì)胞調(diào)控機(jī)制的相關(guān)研究中,浙江大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)為了研究miR-192-5p調(diào)節(jié)糖酵解的靶基因,使用Starvio siRNA轉(zhuǎn)染試劑的兄弟產(chǎn)品RFectsiRNA轉(zhuǎn)染試劑將三種相關(guān)糖酵解基因(PFKFB3、GLUT1、MYC)的siRNA轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞(HLF)和敲除miR-192-5p的HLF細(xì)胞(HLF-192KO細(xì)胞)。WB檢測(cè)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)相關(guān)糖酵解基因編碼的蛋白表達(dá)量都顯著降低。此外,熒光定量結(jié)果顯示,單獨(dú)轉(zhuǎn)染siRNA si-PFKFB3或si-GLUT1,以及共轉(zhuǎn)染si-PFKFB3和si-GLUT1到HLF-192KO細(xì)胞后,相關(guān)mRNA的表達(dá)均可降低50%以上!
另外,文章中還使用RFect siRNA轉(zhuǎn)染試劑將MYCsiRNA轉(zhuǎn)染到其他人肝癌細(xì)胞(Huh7、HLE和HepG2)中,熒光定量結(jié)果顯示各細(xì)胞中相關(guān)mRNA的表達(dá)量相比對(duì)照都顯著降低。在之后對(duì)機(jī)制的進(jìn)一步的研究中,研究者們又使用RFect siRNA轉(zhuǎn)染試劑將相關(guān)基因siRNA轉(zhuǎn)染了人肝星狀細(xì)胞(LX2)和人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞(THP1),WB的結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)相關(guān)基因的蛋白表達(dá)量都顯著降低。
相關(guān)文章:J Exp Clin Cancer Res. 2020 Nov 30;39(1):268.